文献类型：期刊文章

作　　者：后来旺[1] 李达容[1] 邓波[2] 赵勇[1,3,4] 潘迎捷[1,3,4] 丰东升[2] 孙晓红[1,3,4]

HOU Laiwang;LI Darong;DENG Bo;ZHAO Yong;PAN Yingjie;FENG Dongsheng;SUN Xiaohong(College of Food Science and Technology,Shanghai Ocean University,Shanghai 201306,China;Shanghai Agricultural Products Quality and Safety Testing Center,Shanghai 201799,China;Laboratory of Quality&Safety Risk Assessment for Aquatic Products on Storage and Preservation(Shanghai),Ministry of Agriculture and Rural Affairs,Shanghai 201306,China;Shanghai Engineering Research Center of Aquatic-product Processing&Preservation,Shanghai 201306,China)

机构地区：[1]上海海洋大学食品学院,上海201306 [2]上海市农产品质量安全中心,上海201799 [3]农业农村部水产品贮藏保鲜质量安全风险评估实验室(上海),上海201306 [4]上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心,上海201306

出　　处：《食品科学》

基　　金：上海市科技兴农重点攻关项目(2019-02-08-00-10-F01149)。

年　　份：2022

卷　　号：43

期　　号：4

起止页码：331-339

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD2021_2022、EAPJ、EI、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：靶向金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)保守基因(nuc)序列设计特异性引物,经引物筛选和反应条件的优化,建立金黄色葡萄球菌的重组酶等温扩增(recombinase aided amplification,RAA)结合侧流层析试纸条(lateral flow dipstick,LFD)的快速检测方法。该方法在引物浓度200 nmol/L、33℃反应20 min即可实现靶标基因片段的有效扩增。特异性分析结果表明RAA-LFD方法检测金黄色葡萄球菌与其他常见致病菌菌株间不存在交叉反应,灵敏度分析结果表明RAA-LFD方法检测金黄色葡萄球菌的检出限为4 fg/μL(DNA)与1.83×10^(2) CFU/mL(纯菌液)。用人工污染牛奶样品验证RAA-LFD方法的可靠性,结果显示在增菌6 h时,RAA-LFD方法可检测到1.83×10^(1) CFU/mL金黄色葡萄球菌。分别采用微生物生化鉴定法、PCR法与RAA-LFD方法对64份牛奶样品进行金黄色葡萄球菌检测,结果表明,RAA-LFD方法与微生物生化鉴定法总符合率为95.3%,与PCR法总符合率(98.4%)表现出较高的一致性。本研究建立的可视化检测方法具有特异性强、灵敏度高、快速高效、操作简单、检测结果直观、对仪器设备要求低等特点,为牛奶中金黄色葡萄球菌的检测提供新的发展方向。

关 键 词：金黄色葡萄球菌 重组酶等温扩增技术  侧流层析试纸条  快速检测  

分 类 号：R155.5]