文献类型：期刊文章

作　　者：谢健龙[1] 区泳芳[2] 陈永华[2] 常岸芷[3] 缪辉来[3,4]

XIE Jianlong;OU Yongfang;CHEN Yonghua;CHANG Anzhi;MIAO Huilai(Department of Cardiothoracic Surgery,Affiliated Hospital of Guangdong Medical University,Zhanjiang Guangdong 524001;Department of Pathological Diagnosis and Research Center,Affiliated Hospital of Guangdong Medical University,Zhanjiang Guangdong 524001;Department of Hepatobiliary Surgery,Second Affiliated Hospital of Guangdong Medical University,Zhanjiang Guangdong 524003;Department of General Surgery,Dongguan Liaobu Hospital,Dongguan Guangdong 523400,China)

机构地区：[1]广东医科大学附属医院心胸外科,广东湛江524001 [2]广东医科大学附属医院病理诊断与研究中心,广东湛江524001 [3]广东医科大学附属第二医院肝胆外科,广东湛江524003 [4]东莞寮步医院普外科,广东东莞523400

出　　处：《临床与病理杂志》

基　　金：国家自然科学基金(82070637);东莞市社会科技发展重点项目(2018507150391621);湛江市非资助科技攻关计划项目(2021B01454);广东医科大学青年培育基金项目(GDMUQ2021010)。

年　　份：2022

卷　　号：42

期　　号：6

起止页码：1263-1274

语　　种：中文

收录情况：CAS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:探究miR-23b通过调节转化生长因子-β1(transforming growth factorβ,TGF-β1)/SMAD同源物3(mothers against decapentaplegic homolog 3,SMAD3)信号通路对博莱霉素(bleomycin,BLM)所致大鼠肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)及自噬水平的影响。方法:采用BLM诱导大鼠PF模型,并分为对照组、PF组、agomiR-阴性对照(negative control,NC)组和agomiR-23b组。通过生物信息学预测及双荧光素酶实验验证miR-23b对SMAD3的调控作用;用苏木精-伊红(hematoxylineosin stain,HE)和Masson染色观察大鼠肺组织病理学改变,免疫组织化学染色观察大鼠肺组织Ⅰ型胶原蛋白(collagen-Ⅰ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、酵母自噬相关基因6(autophagy related protein 6,ATG6)的哺乳动物同源体(beclin-1)、轻链3-Ⅱ(light chain 3-Ⅱ,LC3-II)的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测肺组织中miR-23b和SMAD3 mRNA的表达,蛋白质印迹法检测肺组织中TGF-β1、SMAD3和SMAD7的蛋白质表达。将人肺成纤维细胞(HFL1)分为对照组、PF组、agomiR-NC组和agomiR-23b组;用RT-qPCR检测各组细胞中miR-23b和SMAD3 mRNA的表达,Transwell小室实验检测各组细胞迁移和侵袭能力,透射电镜观察各组细胞自噬泡的形成。结果:与对照组相比,PF组和agomiR-NC组PF程度更严重;肺组织SMAD3 mRNA以及collagen-Ⅰ、α-SMA、TGF-β1和SMAD3蛋白表达水平明显升高,miR-23b以及beclin-1、LC3-Ⅱ和SMAD7蛋白表达水平明显降低;HFL1细胞SMAD3 mRNA表达水平以及迁移和侵袭能力提高,自噬活性降低(均P<0.05)。与PF组相比,agomiR-23b组大鼠PF程度得到有效改善;肺组织collagen-Ⅰ、α-SMA、TGF-β1和SMAD3蛋白表达水平明显降低,beclin-1、LC3-Ⅱ和SMAD7蛋白表达水平明显升高;HFL1细胞迁移、侵袭能力降低,自噬活性增强(P<0.05)。结论:MiR-23b通过靶向抑制SMAD3的表达抑制肺成纤维细胞的迁移,降低PF程度,

关 键 词：miR-23b  转化生长因子-β1/SMAD家族成员3  博莱霉素 肺纤维化 自噬

分 类 号：R563]