文献类型：期刊文章

作　　者：张轶西[1] 宋飞玉[2] 郭义文[3] 曾志贵[1]

ZHANG Yixi;SONG Feiyu;GUO Yiwen;ZENG Zhigui(Department of General Surgery,Beijing Friendship Hospital,Capital Medical University,Beijing 100050,China;Jilin Kangnai Pharmaceutical Co.,LTD,Jilin 132013,China;Department of Transplantation Center,First Affiliated Hospital,Sun Yat-Sen University,Guangzhou 510080,China)

机构地区：[1]首都医科大学附属北京友谊医院普通外科,北京100050 [2]吉林康乃尔药业有限公司,吉林吉林132013 [3]中山大学附属第一医院器官移植科,广东广州510080

出　　处：《吉林大学学报（医学版）》

基　　金：北京市科学技术委员会自然科学基金面上项目(7202033);北京市医管中心“青苗”计划项目(QML20200104);首都医科大学附属北京友谊医院种子计划项目(YYZZ202005)。

年　　份：2023

卷　　号：49

期　　号：4

起止页码：994-1000

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2020、CAS、CSCD、CSCD_E2023_2024、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:探讨过表达Dectin-1基因对树突状细胞(DCs)功能的影响,阐明Dectin-1基因抑制DCs成熟活化发挥免疫学功能的机制及对小鼠心脏移植物的免疫保护作用。方法:小鼠骨髓干细胞诱导形成DCs后进行体外培养扩增,采用带有绿色荧光蛋白(GFP)标签的腺病毒载体将Dectin-1基因转染至DCs,经过Dectin-1基因修饰的未成熟DCs (imDCs)为DC-Dectin-1组,同时设未经病毒转染的DCs组和转染GFP (DC-GFP)组,24 h后采用免疫荧光染色法检测腺病毒转染情况,采用Western blotting法检测各组DCs中Dectin-1蛋白表达情况,采用流式细胞术和酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测脂多糖(LPS)刺激前后各组DCs表型、功能和细胞培养上清液中白细胞介素10(IL-10)和白细胞介素12 (IL-12)水平。建立同种异体小鼠腹部异位心脏移植模型,分为DCs组、DC-GFP组和DC-Dectin-1组,于移植术后第1、3和5天分别输入DCs、DC-GFP和DC-Dectin-1,移植术后第7天HE染色观察各组小鼠心脏移植物病理形态表现,TUNEL染色观察各组小鼠心脏移植物细胞凋亡情况,观察各组小鼠心脏移植物中位存活时间(MST)。结果:经基因修饰的Ad5F35载体可提高Dectin-1基因转染效率,转染后GFP可持续在DCs中表达。LPS刺激前,DCs、DC-GFP和DC-Dectin-1组细胞中CD40、CD80、CD86和人类主要组织相容性复合体Ⅱ(MHC-Ⅱ)表达水平均较低,呈现imDCs表型;与LPS刺激前比较,LPS刺激后DCs组和DC-GFP组细胞中CD40、CD80、CD86和MHC-Ⅱ表达水平升高,呈现成熟DC表型,而DC-Dectin-1组细胞中CD40、CD80、CD86和MHC-Ⅱ表达水平仍较低。LPS刺激前,各组细胞培养上清液中IL-10和IL-12水平比较差异无统计学意义(P>0.05);LPS刺激后,与DCs组和DC-GFP组比较,DC-Dectin-1组细胞培养上清液中IL-10水平明显升高(P<0.05),IL-12水平明显降低(P<0.05)。移植术后第7天,与DCs组和DC-GFP组比较,DC-Dectin-1组小鼠心脏移植物组织中炎性细胞浸润减少,排斥反应表现�

关 键 词：DECTIN-1 基因转染  树突状细胞  心脏移植物 免疫耐受

分 类 号：R392.4] R617[基础医学类]