文献类型：期刊文章

作　　者：肖潇[1] 夏宜平[1] 崔柳[2] 张佳平[1] 洪震[3] 任梓铭[2]

XIAO Xiao;XIA Yiping;CUI Liu;ZHANG Jiaping;HONG Zhen;REN Ziming(Genomics and Genetic Engineering Laboratory of Ornamental Plants,College of Agriculture and Biotechnology,Zhejiang University,Hangzhou 310058,Zhejiang,China;Department of Landscape Architecture,School of Civil Engineering and Architecture,Zhejiang Sci-Tech University,Hangzhou 310018,Zhejiang,China;Scientific Research Management Center of East China Pharmaceutical Botanical Garden,Lishui 323000,Zhejiang,China)

机构地区：[1]浙江大学农业与生物技术学院,观赏植物基因组与基因工程实验室,浙江杭州310058 [2]浙江理工大学建筑工程学院风景园林系,浙江杭州310018 [3]华东药用植物园科研管理中心,浙江丽水323000

出　　处：《浙江大学学报(农业与生命科学版)》

基　　金：浙江省基础公益研究计划项目(ZCLTGN24C1601);浙江省农业新品种重大专项花卉育种专项(2021C02071-6);国家自然科学基金项目(32101571)。

年　　份：2025

卷　　号：51

期　　号：1

起止页码：89-101

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2023、核心刊

摘　　要：本研究以浙江省野生资源丰富的海滨石蒜(Lycoris insularis)为材料,构建了以鳞茎为外植体的石蒜同源基因沉默体系,并通过该体系验证了海滨石蒜鳞茎发生基因的生物功能。通过设计特异性引物,从鳞茎中克隆获得LiCWIN基因片段,全长1 706 bp;经双酶切后与烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus, TRV)载体TRV2-GFP连接,从而构建病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing, VIGS)重组载体;转化根癌农杆菌后,用菌液侵染损伤刺激后的鳞茎块。侵染2 d后,观察到鳞茎维管组织中存在绿色荧光;实时荧光定量聚合酶链反应(real time fluorogenic quantitative polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测发现,沉默组LiCWIN基因表达量显著降低。侵染40 d后,相较于空载体对照组,LiCWIN基因沉默组小鳞茎发生数量下降且发育迟缓。上述结果表明,VIGS体系在海滨石蒜鳞茎组织中成功沉默了功能基因,且对小鳞茎后期发育的表型产生了持续影响。特别是LiCWIN基因沉默后,小鳞茎发生受阻。本研究为石蒜鳞茎发生发育关键基因的功能研究奠定了基础。

关 键 词：石蒜属 基因功能  瞬时验证  病毒诱导的基因沉默  体系构建  CWIN基因  小鳞茎发生  

分 类 号：S682.29]