文献类型：期刊文章

作　　者：杨书仁[1] 朱志梅[1] 许艺凡[1] 李慧[1] 王术德[1] 高慎阳[1]

Yang Shuren;Zhu Zhimei;Xu Yifan;Li Hui;Wang Shude;Gao Shengyang(College of Animal Husbandry and Veterinary Medicine,Jinzhou Medical University,Liaoning Provincial Key Laboratory of Livestock Product Quality and Safety Engineering,Liaoning Jinzhou 121001)

机构地区：[1]锦州医科大学畜牧兽医学院,辽宁省畜产品质量与安全工程重点实验室,辽宁锦州121001

出　　处：《现代畜牧兽医》

基　　金：辽宁省教育厅面上项目(JYTMS20231735);辽宁省科学技术计划农业重大专项(2023JH110200006)。

年　　份：2025

期　　号：5

起止页码：1-7

语　　种：中文

收录情况：普通刊

摘　　要：试验旨在研制一种安全、稳定性强的戊型肝炎(HEV)和甲型肝炎(HAV)两联装甲RNA阳性质控品。利用装甲RNA技术,设计将HEV与HAV标准检测靶基因序列串联合成MS2-HE-AV基因片段,将其克隆到pET-28b载体中构建重组质粒pET-28b-MS2-HE-AV608,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导原核表达、纯化制备HE-AV二联病毒样颗粒(VLPs),并对其稳定性、回收率进行验证以评价其实际应用性能。结果显示,试验成功构建包含MS2外壳蛋白和外源靶基因的重组载体,目的蛋白高效表达,电镜下可见直径约为27 nm的VLPs。该VLPs可耐受全能核酸酶降解作用。VLPs中HEV和HAV检测靶标定值结果分别为1.88×10^(9)、1.17×10^(9)copies/μL。该VLPs在4℃条件下至少可保存21 d,符合国家标准中对于VLPs保存期的基本规定。实际样品检测结果显示,当人工污染样品的VLPs浓度稀释为1000、10000倍时,4种样品基质中装甲RNA回收率均大于1%。研究表明,HE-AV两联VLPs能够有效抵抗全能核酸酶的降解作用、热稳定性好、适用性强,可作为HEV和HAV核酸检测的阳性质控品全程监控病毒核酸检测过程。

关 键 词：戊型肝炎病毒 甲型肝炎病毒 阳性质控品  装甲RNA  

分 类 号：S855.4]