文献类型：期刊文章

作　　者：朱清华[1,2,3] 袁博[3,4] 王一伦[1] 任淼[1] 李晓飞[1] 王思邈[1] 甄子萱[1] 付秀美[1,3]

ZHU Qinghua;YUAN Bo;WANG Yilun;REN Miao;LI Xiaofei;WANG Simiao;ZHEN Zixuan;FU Xiumei(Department of Human Anatomy,School of Basic Medical Sciences,Chengde Medical College,Chengde 067000,Hebei,China;Institute of Basic Medical Sciences,Chengde Medical College,Chengde 067000,Hebei,China;Hebei Provincial Key Laboratory of Nerve Injury and Repair,Chengde 067000,China;Department of Pathogenic Biology and Immunology,Chengde College of Nursing,Chengde 067000,China)

机构地区：[1]承德医学院基础医学院人体解剖学教研室,河北承德067000 [2]承德医学院基础医学研究所,河北承德067000 [3]河北省神经损伤与修复重点实验室,河北承德067000 [4]承德护理职业学院病原生物与免疫教研室,河北承德067000

出　　处：《吉林大学学报(医学版)》

基　　金：河北省科技厅自然科学基金项目(H2021406056);河北省高等学校科学研究计划项目(ZD2020178);河北省神经损伤与修复重点实验室开放项目(NJKF-202403);承德医学院人体解剖与组织胚胎学优势学科资助项目(〔2023〕22号)。

年　　份：2025

卷　　号：51

期　　号：4

起止页码：984-995

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2023、核心刊

摘　　要：目的:探讨脂肪源性干细胞(ADSCs)诱导分化的施万样细胞(SCLCs)高表达的神经生长因子(NGF)对大鼠背根神经节(DRG)细胞突起生长的促进作用,并阐明其作用机制。方法:从SD大鼠附睾旁脂肪中提取ADSCs,通过成骨诱导、成脂诱导和成软骨诱导鉴定ADSCs的多向分化能力。将ADSCs诱导分化为SCLCs,并通过免疫荧光法和Western blotting法检测ADSCs和SCLCs中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及S100钙结合蛋白β(S100β)表达水平。分离培养大鼠DRG细胞,采用免疫荧光法检测DRG细胞中Ⅲ类β微管蛋白(βⅢ-tubulin)以鉴定DRG细胞。将SCLCs与DRG细胞共培养(共培养组),DRG细胞单独培养作为DRG组。利用甲苯胺蓝染色在光学显微镜下观察并测量共培养组和DRG组细胞的突起长度。采用小干扰RNA(siRNA)转染技术敲低NGF,质粒转染技术过表达NGF,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中NGF mRNA表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组细胞上清中NGF蛋白表达水平。将转染后的SCLCs与DRG细胞共培养,分为对照组、siNC/vector组、NGF敲低组(si-NGF组)和NGF过表达组(oe-NGF组),观察各组DRG细胞突起的长度。结果:原代ADSCs接种24 h后基本贴壁并留有少量脂滴,培养3 d后细胞多为短梭形、纺锤状或多角形,呈旋涡状生长,增长迅速,传代后细胞形态均一,呈长梭形,鱼群状排列。ADSCs经成脂诱导培养基培养14 d后,细胞形态由梭形变为扁圆形,中间可见透亮的圆形脂滴形成,经油红O染色可见细胞质中的脂滴被染成红色。ADSCs经成骨诱导培养基培养28 d后可见细胞呈沙粒样,形态模糊,出现钙化结节,经茜素红染色后可见钙化结节被红染,沉积在细胞外基质。ADSCs经成软骨诱导培养基立体培养28 d后可见小米粒大小的软骨球生成,对软骨球进行冰冻切片,阿利辛蓝染色后显微镜下可见软骨组织中的酸性黏多糖被染色成蓝色。在荧光显微镜下观察纯化后�

关 键 词：施万样细胞  神经生长因子 背根神经节细胞 脂肪源性干细胞 周围神经损伤

分 类 号：R322.8]