文献类型：期刊文章

作　　者：唐俊[1,2] 陆娟[1] 许惠芬[3] 陈捷[2]

机构地区：[1]阜阳师范学院生命科学学院,安徽阜阳236037 [2]上海交通大学农业与生物学院,上海200240 [3]山东省淄博市桓台县林业局,山东淄博256400

出　　处：《西北农林科技大学学报（自然科学版）》

基　　金：国家自然科学基金项目(41001189);安徽省高校自然科学研究重点项目(KJ2013A203);阜阳师范学院科技成果孵化基金项目(2013KJFH04);阜阳师范学院教研项目(2013JYXM30)

年　　份：2014

卷　　号：42

期　　号：10

起止页码：147-151

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2011、CAB、CSCD、CSCD2013_2014、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：【目的】对康氏木霉HEX1蛋白进行原核表达和纯化,为进行抗体制备及深入研究HEX1功能奠定基础。【方法】采用RT-PCR方法扩增康氏木霉hex1基因,构建pMD19-T-hex1重组克隆质粒,在此基础上构建pET28a-hex1表达载体,转化E.coli BL21(DE3)细胞。通过IPTG诱导表达,对重组HEX1蛋白进行可溶性分析、纯化及鉴定。【结果】成功克隆了长660bp的hex1基因并构建了融合表达载体,HEX1蛋白在IPTG诱导下得到表达。融合蛋白主要以包涵体形式存在,能与抗His标签的兔多克隆抗体发生特异性反应,并纯化出了融合表达蛋白。【结论】康氏木霉HEX1蛋白在原核细胞中得到成功表达及纯化,获得了分子质量约为25ku的重组蛋白。

关 键 词：康氏木霉 HEX1  原核表达 蛋白纯化

分 类 号：Q78]