文献类型：期刊文章

作　　者：何宏轩[1,2] 秦曦明[1] 张强哲[1] 汤义[1] 刘丽艳[1,2] 郑昌学[1] 段明星[1]

机构地区：[1]清华大学生物科学与技术系,生物膜与膜生物工程国家重点实验室,北京100084 [2]河南职业技术师范学院动物科学系,新乡453003

出　　处：《生物化学与生物物理进展》

年　　份：2004

卷　　号：31

期　　号：2

起止页码：163-166

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2000、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、SCI-EXPANDED(收录号：WOS:000224104800012)、SCIE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：血凝素 (HA)是决定禽流感病毒的毒力强弱和免疫原性的主要蛋白质 .根据已发表的H9亚型AIV的HA基因序列 ,设计合成了 1对H9HA特异引物 ,以AIVA/Chicken/Henan/ 1 / 1 999/ (H9N2 )核酸为模板 ,通过RT PCR扩增出 1条 1 6kbcDNA片段 .将HA基因插入pVAX1中 ,构建了真核表达质粒pVAX H9.采用活体电击法免疫 3周龄SPF鸡 1 0只 ,剂量为 5 0 μg/只 ,3周后加强免疫一次 ,5周后以 1 0 0倍鸡胚感染剂量 (EID)的HA基因同源病毒对所有鸡进行攻毒 .其间每周检测抗体水平变化 ,6周后以棉拭子进行泄殖腔病毒分离 .结果为攻毒后免疫组鸡HI效价为 9log2～ 1 0log2 ,对照组为 2log2～ 4log2 ;免疫组病毒分离数为 0 / 1 0 ,对照组为 1 0 / 1 0 .

关 键 词：禽流感病毒 血凝素基因 RT-PCR  克隆  DNA疫苗

分 类 号：S852.659.5] S858.3[动物医学类]