文献类型：期刊文章

作　　者：尹惠琼[1] 范泉水[1] 谭德勇[2] 王双印[1] 孙阳[1] 李刚山[1] 邱薇[1] 余敏[2]

机构地区：[1]成都军区联勤部军事医学研究所,昆明650032 [2]云南大学生化学院生物技术系生化室,昆明650091

出　　处：《中国免疫学杂志》

年　　份：2004

卷　　号：20

期　　号：5

起止页码：338-340

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2000、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的 :构建抗五步蛇毒的特异性ScFv噬菌体显示文库 ,并从中筛选出阳性克隆。方法 :用五步蛇毒素免疫BALB C小鼠 ,挑选其中效价最高的 3只小鼠提取脾脏组织 ,抽提细胞总RNA ,经RT PCR分别扩增出VH、VL基因片段 ,经Linker连接成ScFv基因 (singlechainvariablefragment) ,再把ScFv基因重组到pCANTAB 5E载体 ,转化至大肠杆菌TG1中表达 ,经辅助噬菌体 (Helperphage)M13K0 7拯救后建成噬菌体显示文库。结果 :经 4轮吸附 洗脱 富集筛选后 ,库容量达到 4× 10 8cfu L ,随机挑取 90个克隆进行ELISA检测 ,结果 16个呈阳性 ,并进行了重复验证。结论

关 键 词：五步蛇 蛇毒 单链抗体 噬菌体显示文库  

分 类 号：R392.13]